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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

甲狀旁腺是哺乳動(dòng)物體腺之一，有兩對(duì)，棕黃色，分別位于左右兩葉甲狀腺背面的中部和下部，其主要功能為分泌甲狀旁腺，調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣、磷的代謝。甲狀旁腺功能減退癥是指甲狀旁腺分泌減少或功能障礙的一種臨床綜合癥。

細(xì)胞特性：

1）細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常甲狀旁腺組織。

2）細(xì)胞鑒定：PTH熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠CD63分子(CD63)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： CD63 ELISA Kit

Rabbit tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 3 (AIL-R3) ELISA Kit 兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測(cè)試劑盒

MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲狀腺素

通用型細(xì)胞周期流式細(xì)胞分析試劑盒100次

ELISAKitADM大鼠腎上腺髓質(zhì)素

馬松(Masson)三色法染色試劑盒 500ml

Trk B 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原 0.5mgTrk B 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原)

INSR重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (short isoform, His 標(biāo)簽) Protein

ANTXR2 Protein Human 重組人 ANTXR2 / CMG2 蛋白

VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白

Trk B 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原 0.5mgTrk B 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種(抗原)

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豬環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA 試劑盒

Human keratinocyte growth factor (KGF) ELISA Kit 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)檢測(cè)試劑盒

PorcineGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 豬生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlphaHBDH(MouseAlpha-HydroxybyrateDehydrogenase)ELISAKit小鼠α羥基脫氫酶

血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

Plahormoneabscisicacid,ABAELISAKit植物激素脫落酸(ABA)檢測(cè)試劑盒

小鼠甲狀旁腺細(xì)胞豬催乳素（PRL）檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬促胃液素受體(GsaR)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬促卵泡素(FSH)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。