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原代細胞的分離與培養(yǎng)
點擊次數(shù)：751 更新時間：2020-07-24
原代細胞是指來源活體組織，經(jīng)過特定分離方法制備而成的初始細胞。
原代細胞離體時間短且不經(jīng)過永生化過程，其生物學特性未發(fā)生很大變化，仍保持原有的遺傳特征，可更好地反映細胞在體內(nèi)的生長狀態(tài)，從而獲得與體內(nèi)生理功能更接近的數(shù)據(jù)，很適合用于藥物測試、細胞分化和轉化等實驗研究。
原代細胞是出了名的難養(yǎng)，對培養(yǎng)環(huán)境和實驗操作的要求更苛刻。細胞在體外通常只能傳代少數(shù)幾次，某些細胞（如神經(jīng)元細胞）甚至無法進行傳代。對于研究人員來說，如何才能經(jīng)濟高效地培養(yǎng)好細胞，并圍繞這有限幾次傳代的細胞設計實驗，是更大的一個挑戰(zhàn)。
原代細胞是取材于切除的動物組織，通過酶處理，在適當?shù)臈l件下培養(yǎng)直至達到足夠的數(shù)量。分離的細胞有兩種類型：貼壁細胞（錨定依賴性生長）和懸浮細胞（錨定非依賴性），貼壁細胞多來自器官組織，而懸浮細胞多來自血液系統(tǒng)的細胞。
從組織制備細胞，即使捱過了極其嚴苛的解離步驟，不嚴謹?shù)姆蛛x操作可能會導致細胞生長緩慢、表型不一致甚至細胞污染，特別是由于組織中可能含有細菌等微生物，污染問題對于細胞的分離和培養(yǎng)是一個很大的隱患。而為了讓研究人員不再為這些問題頭疼，現(xiàn)在已經(jīng)出現(xiàn)了一些細胞公司可供應現(xiàn)成的細胞，并對應配有充分優(yōu)化的培養(yǎng)基和實驗方案，這使得細胞的培養(yǎng)和研究比以往要輕松得多。
而對于具備自主從組織中獲取細胞的實驗室，也建議以商業(yè)化的細胞作為對照，采用均一性和穩(wěn)定性更好的P2/P3代次進行實驗，并用專門的細胞培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，zui大限度提高原代細胞的生長。
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